C18液相色譜柱的適用范圍廣泛,無(wú)論是小分子的有機(jī)化合物、藥物活性成分,還是大分子的蛋白質(zhì)、多肽等生物樣品,都能在其上獲得較好的分離效果。其次,C18柱具有良好的選擇性和穩(wěn)定性,在不同的分析條件下,如不同的pH值、流動(dòng)相組成變化等情況下,仍能保持相對(duì)穩(wěn)定的分離性能。此外,它還具有較高的柱效和分辨率,能夠有效地分離結(jié)構(gòu)相近的化合物,為復(fù)雜的樣品分析提供了可靠的技術(shù)支持。
然而,C18液相色譜柱的使用也需要注意一些事項(xiàng)。例如,樣品溶液的前處理至關(guān)重要,需要去除可能堵塞色譜柱或干擾分析的雜質(zhì)、顆粒等。同時(shí),流動(dòng)相的選擇和配制也需要嚴(yán)格遵循相關(guān)原則,避免使用會(huì)損壞硅膠基質(zhì)或影響鍵合相穩(wěn)定性的溶劑。另外,色譜柱在使用過程中需要定期進(jìn)行維護(hù)和保養(yǎng),如沖洗、再生等操作,以延長(zhǎng)其使用壽命并保持良好的分離性能。
C18液相色譜柱的安裝與使用:
-正確安裝:安裝色譜柱時(shí)要注意箭頭指示,使其與流動(dòng)相流向一致。因?yàn)槎鄶?shù)色譜柱有優(yōu)選流動(dòng)方向,正確流向可避免堵塞和損壞,保證分離效果穩(wěn)定、重現(xiàn)性好。
-選擇合適保護(hù)柱:使用液相保護(hù)柱能防止非揮發(fā)性材料損壞和污染色譜柱。保護(hù)柱填料粒徑應(yīng)與色譜柱盡量相同,以減少死體積、保持良好分離性能,并定期更換其中填料。
-避免物理沖擊:使用和搬運(yùn)過程中要輕拿輕放,防止猛烈撞擊或掉落導(dǎo)致柱床產(chǎn)生空隙和通道,造成峰拖尾、柱效損失,影響分析結(jié)果準(zhǔn)確性。
清洗與再生
-定期清洗:使用一段時(shí)間后,色譜柱會(huì)積累殘留物和雜質(zhì),需定期清洗恢復(fù)性能。清洗時(shí)要選與分析樣品兼容的溶劑,避免強(qiáng)腐蝕性溶劑損壞色譜柱。
-再生色譜柱:對(duì)于難清洗的殘留物可采用再生方法,如反向沖洗、超聲波清洗等。反向沖洗可改變流動(dòng)相方向沖出殘留物;超聲波清洗利用空化效應(yīng)去除雜質(zhì)。
-控制流速:清洗和再生時(shí)要避免過高流速,否則會(huì)對(duì)色譜柱產(chǎn)生過大壓力導(dǎo)致?lián)p壞,應(yīng)根據(jù)耐壓范圍和使用說明合理設(shè)置流速。