高壓制備純化色譜系統(tǒng)的原理主要基于液相色譜法,并在高壓條件下進行操作。其工作原理是利用混合物中各組分在固定相和流動相之間的分配系數(shù)差異進行分離。具體來說:
固定相與流動相:固定相通常是一種惰性的、多孔的固體或液體材料,固定在色譜柱內(nèi);流動相則是含有被分析物質(zhì)的液體,在高壓泵的作用下通過色譜柱。
分配與洗脫:在分析過程中,流動相中的組分在通過色譜柱時,由于它們與固定相之間的親和力不同,因此它們在固定相中的保留時間也不同。與固定相親和力較小的組分將首先被洗脫出來,而與固定相親和力較大的組分則保留時間較長。
檢測與記錄:通過檢測器對洗脫出來的組分進行檢測,可以得到它們的濃度隨時間的變化曲線,即色譜圖。這一過程中,泵系統(tǒng)提供高壓驅(qū)動流動相通過色譜柱,進樣系統(tǒng)用于將樣品引入流動相中,而數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)則用于記錄和處理檢測器產(chǎn)生的信號,并生成色譜圖。
高壓制備純化色譜系統(tǒng)具有多種特點,使其成為生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、有機合成產(chǎn)物等領(lǐng)域中不可少的實驗室分離純化設(shè)備:
高效分離:由于操作在高壓條件下進行,使得分析速度更快,分離效率更高。
多元梯度系統(tǒng):可以滿足不同樣品分離的需求,提高分離的靈活性和準確性。
高準確度與精密度:泵流量的高準確度和精密度保證了實驗結(jié)果的可靠性。
自動餾分收集:系統(tǒng)通常配備有自動餾分收集器,可以方便地收集分離后的各個組分。
靈活性與可擴展性:系統(tǒng)的設(shè)置靈活,使得分析方法由分析色譜向制備色譜擴展更為容易。同時,系統(tǒng)易于升級,可以引入新的分離純化技術(shù)。
多種檢測器選擇:系統(tǒng)支持選配多種檢測器,如紫外-可見光檢測器、熒光檢測器等,以滿足不同樣品檢測的需求。